Estudio de citotoxicidad del MTT

La prueba de citotoxicidad MTT es un ensayo colorimétrico que se utiliza para evaluar la biocompatibilidad de los materiales de dispositivos médicos mediante la medición de su impacto en la viabilidad celular. La prueba determina si las sustancias liberadas por un dispositivo son tóxicas para las células cultivadas. Se basa en la reducción del MTT —una sal de tetrazolio amarilla— por las enzimas mitocondriales de las células vivas, formando cristales de formazán púrpura. La intensidad del color se correlaciona con el número de células viables. Este ensayo se utiliza ampliamente durante la selección de materiales, las pruebas preclínicas y la presentación de documentación regulatoria para garantizar que los dispositivos no induzcan efectos celulares perjudiciales.

¿Por qué se realiza esta prueba?

Las pruebas MTT se realizan para:

• Identificar los efectos citotóxicos de los materiales utilizados en dispositivos médicos.
• Asegúrese de que las sustancias lixiviables del dispositivo no afecten el metabolismo o la proliferación celular.
• Brindar apoyo al cumplimiento normativo y a la seguridad del producto durante el desarrollo y la aprobación previa a la comercialización.
• Sustituir o reducir la experimentación animal proporcionando una alternativa in vitro fiable.

¿Has probado nuestra herramienta Test Navigator? Pruébalo ahora

Pasos para realizar esta prueba

1. Preparación del extracto: El dispositivo se incuba en un medio de extracción adecuado bajo condiciones controladas.
2. Exposición celular: Las células de mamíferos cultivadas se exponen al extracto.
3. Adición de MTT: Se añade el reactivo MTT al cultivo; las células viables lo reducen a formazán.
4. Desarrollo de color: Tras la incubación, el formazán se solubiliza y la absorbancia se mide espectrofotométricamente.
5. Interpretación de datos: Una viabilidad celular inferior al 70% en comparación con el control del reactivo indica potencial citotóxico.

Normas, orientación y reglamentos

• Norma ISO 10993-5: El estándar principal para las pruebas de citotoxicidad in vitro, incluidos los protocolos de ensayo MTT y los criterios de aceptación.
• Norma ISO 10993-12: Proporciona orientación sobre los métodos de preparación y extracción de muestras.
• Orientación de la FDA sobre biocompatibilidad: Recomienda realizar pruebas de citotoxicidad como parte de una evaluación biológica basada en el riesgo.